测试时，将全血/血清/血浆标本滴加于试纸加样区，全血/血清/血浆标本与预包被的胶体金标记物结合发生梅毒抗原反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析，如是阳性，混合物在层析过程中先与标本中的梅毒抗体结合，随后结合物会被固定在膜上重组抗原结合，在测试区（T）内会出现一条红色条带。如果在测试区（T）内没有出现红色条带，则血标本中不含有梅毒抗体，表明是阴性结果。无论梅毒抗体是否存在于血标本中，混合物都会继续向上层析至质控区（C），质控区的相应抗体与混合物反应出现一条红色条带。质控区（C）内所显现的红色条带是判定层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。